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On observe une modification du diagramme d'émission des dipôles suivant l'indice de la lame de verre sur laquelle ils sont positionnés. De plus, si on compare la quantité d'énergie couplée dans les différents domaines d'émission du dipôle on trouve: Milieu 3 n3 = 1, 33 Milieu 5 n5 = 1, 8 z n5 = 1, 51 θc θc Figure 3. 13. Répartition de l'énergie émise par un ensemble de dipôles orientés aléatoirement à l'interface (zµ = 10 nm) d'une lame de verre d'indice de réfraction n5 = 1, 51 ou n5 = 1, 8. On en déduit que plus l'indice de réfraction de la lame de verre est important et plus cette dernière va collecter une part importante de l'énergie émise par le dipôle dans sa zone sur-critique. Lame De Verre Photos et images de collection - Getty Images. En effet, lorsque l'on décompose en ondes planes l'émission du dipôle, les modes émis dans la zone sur-critique ont leurs composantes radiales comprises entre la valeur du vecteur d'onde dans le milieu 3 (milieu extérieur) et celle dans le milieu 5 (lame de verre). En augmentant l'indice de réfraction de la lame de verre on augmente la valeur du vecteur d'onde dans le milieu 5 (la valeur du vecteur d'onde dans un milieu d'indice de réfraction n est λ π 2 n k =).
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On augmente alors l'intervalle des ondes qui sont propagatives dans le milieu 5 et évanescentes dans le milieu 3 (ondes pour lesquelles k3 < kr < k5, c'est-à-dire 1 < u < n3/n5). Les dipôles ont alors plus de possibilités de se dé-exciter dans ces modes, c'est-à-dire dans la zone sur-critique de la lame de verre. Test lame de verre. En conclusion, plus l'écart d'indice de réfraction entre le milieu extérieur et la lame de verre est important et plus il sera possible de collecter une part importante de la fluorescence des dipôles dans la lame de verre. Discrimination du signal de volume du signal de surface Regardons l'effet du contraste d'indice de réfraction entre le milieu extérieur et la lame de verre sur le couplage de la fluorescence en fonction de l'altitude du dipôle. Pour cela, nous calculons le spectre d'énergie dissipée dP/du(u) d'un ensemble de dipôles orientés aléatoirement à l'interface d'une lame de verre d'indice de réfraction n5 égal à 1, 5 ou 1, 8 pour différentes altitudes de dipôles. L'intégration de dP/du(u) sur les différents domaines d'émission possibles des dipôles permet alors de déterminer la répartition de l'énergie émise par les dipôles.
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34% 21% 45% Haut Sur-critique Sous-critique 41% 25% 34% Dipôle à l'interface d'une lame de verre d'indice de réfraction n = 1, 8 réfraction n = 1, 51 Figure 3. 14. Calcul de la puissance émise dans le domaine sur-critique et dans les modes propagatifs dans le milieu extérieur (milieu 3) en fonction de l'altitude du dipôle et de l'indice de réfraction de la lame de verre. Lame de verre microscope. Le dipôle émet à 580 nm. On remarque que: − l'énergie émise dans les modes propagatifs dans le milieu extérieur (modes pour lesquels 0 ≤ kr ≤ k1) dépend très peu de l'indice de réfraction de la lame de verre. On remarque, néanmoins, que cette énergie oscille en fonction de l'altitude du dipôle. Ces oscillations sont dues aux interférences entre le champ émis directement par le dipôle et celui réfléchi par la lame de verre (Drexhage 1974). Enfin, on observe une baisse de l'énergie émise dans les modes propagatifs pour de faibles altitudes du dipôle. En effet, pour les faibles distances dipôle – lame de verre, les interactions champ proche entre les dipôles et la lame de verre deviennent importantes, ce qui entraîne un couplage de l'énergie des dipôles dans la lame au détriment d'une émission dans les modes propagatifs, − le couplage de la fluorescence dans la lame de verre est fortement dépendant de l'altitude zµ des dipôles par rapport à l'interface.
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La solution que nous avons choisie est alors d'augmenter le contraste d'indice à la surface de la lame grâce au dépôt d'une couche mince de fort indice de réfraction.
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